پیشینه تحقیقات داخلی وخارجی ژیاردیا لاملیا - دانلود رایگان
دانلود رایگان
دانلود رایگان لینک دانلود و خرید پایین توضیحاتدسته بندی : ووردنوع فایل : word (..doc) ( قابل ويرايش و آماده پرينت )تعداد صفحه : 12 صفحه قسمتی از متن word (..doc) : مطالعات انجام شده در ایراندر سال 1391 الهام سادات روئین تن و همکارانش در شهرستان اهواز پس از جمع آوری 50 نمونه مثبت از افراد آلوده به ژیاردیا لامبلیا، با استفاده از PCR به بررسی این انگل پرداختند. آن ها پس از مشاهده باند bp 432، از روش RFLP استفاده کردند. بر این اساس 38% نمونه ها اسمبلیج B III، 16% اسمبلیج A II و در 46% نمونه ها نیز آلودگی مختلط از هر دو اسمبلیج یافت شد. این آزمایش بر اساس ژن gdh (گلوتامات دهیدروژناز) صورت گرفت (67).زهرا بابایی و همکاران نیز در سال 1390 با بررسی این انگل دریافتند روش های مبتنی بر تست های مولکولی و 1 PCR میتواند بهترین و دقیق ترین روش در بررسی انگل ژیاردیا برای مطالعات ژنوتایپینگ باشد. آن ها دریافتند که ناخالصی های موجود در نمونه های مدفوع می تواند در کاهش کیفیت DNA استخراج شده نقش بسزایی داشته باشد. به همین دلیل بر روی 33 نمونه مدفوع روش اصلاح شده ای به همراه گلاس بیت به منظور استخراج DNA اعمال کردند. این کار با استفاده از کیت استخراج از مدفوع کیاژن و روش فریز تاو برای تمامی نمونه ها نتیجه مثبت داشت. سپس بر اساس ژن 2gdh مراحل PCR را ا نجام دادند (19). Polymerase Chain Reaction.Glutamate dehydrogenase.در سال 1390 امین اکبریان و همکارانش در شهر خرم آباد، با استفاده از روش PCR، تفاوتهای ژنتیکی ژیاردیا لامبلیا را مورد بررسی قرار دادند. 30 نمونه مدفوع که از نظر وجود انگل مثبت بودند جمع آوری و بعد از استخراج ژن، تکثیر ژن gdh با استفاده از PCR انجام شد. بد از هم ردیفی توالی gdh بدست آمده با بانک ژن، مشخص شد که همه ژنوتایپ A ژیاردیا لامبلیا هستند و تفاوتی مشاهده نشد (2). همچنین در آزمایش دیگری که توسط زهرا بابایی در سال 1387 بر روی ژیاردیا انجام گرفت، با استفاده از PCR به تعیین اپیدمیولوژی مولکولی این انگل پرداخته شد. این بررسی که در تهران و بر روی 125 نفر به طور تصادفی انجام گرفت، ثابت کرد که روش استخراج DNA به وسیله Glass beads و سرما دهی و گرما دهی ناگهانی به عنوان بهترین روش می تواند مورد استفاده قرار بگیرد. همچنین در این آزمایش به وسیله روش RFLP به تعیین سویه های مختلف ژیاردیا لامبلیا پرداخته شد. نتایج حاصل نشان داد که از مجموع نمونه های مورد بررسی، 87 درصد زیر گروه A و 8/7 درصد زیر گروه B ژیاردیا لامبلیا بودند (18). در مطالعه ای که توسط نیکایین و همکارانش در سال 1382 در ایران انجام شد، DNA از کیست ژیاردیا در نمونه های آلوده استخراج شد. این عمل با 3 روش مختلف انجام گرفت که مشخص شد روش تکرار انجماد و ذوب، بهترین روش استخراج DNA از کیست است. سپس قطعه ای مربوط به ژن پروتئین شوک حراتی انگل hsp70 (Heat Shock Protein)، به عنوان هدف برای PCR مورد استفاده قرار گرفت (59). میترا زارع بوانی و همکارانش در سال 1381 مطالعه ای به منظور تعیین سویه های ژیاردیا لامبلیا در ایران انجام دادند. آنها با استفاده از تروفوزوئیت های به دست آمده از محیط کشت و استخراج DNA آن ها، مراحل pcr را انجام دادند. بدین منظور از دو جفت پرایمر استفاده کردند (بر اساس ژن تریوز فسفات ایزومراز tpi). سپس بعد از اثر آنزیم NcoI دریافتند که این آنزیم بر روی محصولات واکنش هر دو جفت پرایمر، یک جایگاه برش دارد. این آنزیم در محصول حاصل از جفت پرایمر اول دو قطعه bp419 و bp 264 و در محصول حاصل از جفت پرایمر دوم دو قطعه bp228 و bp583 ایجاد می کند. بعد از بررسی قطعات حاصل بر روی ژل الکتروفورز دریافتند که گروه A با هردو پرایمر تکثیر میابد اما گروه B با جفت پرایمر I تکثیر می شود. نتایج نهایی نشان داد که تمامی گروه های مورد بررسی، گروه A بودند (8). در طی سالهای 1378-1380 در شهرستان یزد مطالعه ای برروی بیماران درمانگاه نیکوپور انجام شد که در طی ان شیوع عوامل باکتریایی و پروتوزوایی در مدفوع بیماران مورد بررسی قرار گرفت. در اين مطالعه 470 نمونه مدفوع از بيماران مبتلا، تحت آزمايش مستقيم، كشت نمونه و آنتي بيوگرام باكتريهاي پاتوژن جدا شده قرار گرفت. جهت جدا سازي و تشخيص افتراقي گونه هاي باكتري، از محيط هاي انتخابي و افتراقي استاندارداستفاده شد و جهت تشخيص پروتوزا از تكنيك مستقيم – وست مونت استفاده گرديد (6). نتایج حاصله نشان داد كه 272 نمونه آلوده به باكتري يا پروتوزوآي پاتوژن بودند و از 272 بيمار آلوده، 138 نفر مرد و 134 نفر زن بودند. گونه هاي ايزوله شده به ترتيب فراواني عبارتند از Ecoli enteropatogena 117 مورد، گونه هاي شيگلا 51 مورد، Salmonella enteritidis 25 مورد، Campylobacter jejuni 16 مورد، Giardia lamblia 51 مورد، و Entamoeba histolytica 12 مورد. نتايج اين مطالعه نشان داد كه احتمالاً تعدادي از بيماران بوسيله عوامل غيرباكتريايي و انگلي آلوده بودند. در مطالعه ای که در مركز طبي كودكان تهران توسط دکتر محمد تقی حقی آشتیانی و همکاران انجام شد، نمونه هاي مدفوع كودكاني كه طي 13 سال( 1370 تا 1382 )به مركز مراجعه كرده بودند بررسي شدند. از 64196 نمونه مورد بررسي 14. 27% از نظر انگل مثبت بود که شایعترین انگل جدا شده ژیاردیا 7. 54% بود. شیوع این انگل در پسرها بیشتر از دخترها گزارش شد (4). در سال 1380 فرناز خیر اندیش و همکارانش با بررسی میزان شیوع انگل های روده ای در کارگران نانوایی های شهر خرم آباد که فراوانی کلی انگل های روده ای در 270 نمونه مورد آزمایش، 13. 2% است. بيشترين فراواني در عفونت با تك ياخته ها مربوط به ژيارديا 7. 9% بود (5). - مطالعات انجام شده در جهان در سال 2011 توسط دیوید و همکاران1 مطالعه ای بر روی کودکان پیش دبستانی و دبستانی در منطقه ای بومی انجام شده است. از 573 کودک نمونه مدفوع جمع اوری شد و به وسیله سانتریفیوژ و تکنیک های مبتنی بر PCR مورد پردازش قرار گرفت. در این ارزیابی 277 برای انگل های روده ای مثبت بودند (37).